一、立题依据及意义：

随着物质生活的提高，饮酒已经非常普遍，据WHO估计全球有14亿人存在酒精中毒现象^[1]。长期的酒精滥用和酗酒对中枢神经系统的危害甚大，慢性酒精中毒可致渐进性神经退行性变，对发育期的神经系统，酒精滥用可导致胎儿酒精综合征（FAS），对发育成熟的神经系统，酒精滥用可直接导致记忆丢失，大脑萎缩，痴呆，小脑变性，间接导致Wernicke-Korsakoff病，酒精性糙皮病，视神经病变等^[2]。过度饮酒会导致认知功能障碍，脑结构改变，且一些改变是不可逆的^[3]。慢性酒精中毒可以损害神经元和神经干细胞的功能，能够导致海马体积的减小，大剂量的酒精对神经发生的干扰是海马结构和功能长期减少的基础^[4]。

由于神经元缺乏自我分裂的能力，难以在神经元损伤或死亡后进行有效的组织与功能重建，因此导致现有干预酒精暴露相关神经性疾病的治疗途径收效甚微。近年来，科学家们发现成人中枢和外周神经系统中都存在有神经干细胞（neural stem cell, NSC），它的主要标志物有nestin(巢蛋白)和GFAP-δ(胶质纤维酸性蛋白-δ亚型)，并已确定其在整个生命过程中都分裂，可大部分NSC处于静止状态，成年神经干细胞主要存在于海马齿状回和前侧脑室室下区(SVZ)^[4]。被广泛接受的是神经干细胞能够自我更新，并在特定条件下可以多能分化成其他类型的细胞，产生中枢神经系统中包括神经元和其他脑细胞在内的许多其他细胞^[4]。但研究表明，成年海马齿状回的神经发生受许多内源性和外源性因子的调节，包括基因背景，年龄，性别，神经递质，行为表现，身体锻炼，压力，激素，和药物等^[5]。因此，从内源性或外源性途径有效激活神经干细胞，使其增殖、迁移、分化、存活，取代其他受损的脑组织，有望使相关神经性疾病得以恢复，这将极具临床应用前景。

慢性酒精暴露可影响神经发生中增殖、迁移、分化、存活中的任一时期。它对神经发生的特异作用主要依赖于酒精剂量，作用时间，暴露模式或酒精暴露的持续时间等^[6]。

慢性酒精暴露对海马神经干细胞的危害主要有：①酒精能干扰海马前神经元祖细胞的分裂和迁移；②长期饮酒会引起成年海马神经发生减少；③持续的酒精暴露会显著地使海马颗粒下区的细胞增殖减少，使海马体积减小；④而慢性过度酗酒会增加神经元的变性，干预分化中的神经元的存活，但对海马神经元的自身凋亡无影响；⑤酒精暴露后，海马的形态和神经可塑性会发生改变^[7]。

其中的一些可能的机制有：①Wnt家族,是一组分泌性糖蛋白信号分子。比如Wnt3，表达在成年大鼠海马星形胶质细胞中，在CNS中的Wnt信号作为一个调节通路来调节成年海马的神经发生，控制神经元的命运和神经元前体细胞的增殖，酒精暴露会打乱此信号，会降低海马的神经发生，显著延迟神经元成熟^[5]。②新生神经元接受去极化GABA能神经纤维支配，产生抑制性神经递质GABA，使新生神经元存活。而酒精的作用是作为GABA拮抗剂，这会影响成年雄性大鼠新生神经元的存活^[5]。③酒精通过调节NO合酶的活性，使局部NO生成增多，产生神经毒性^[7]。④酒精，作为一种应激原，激活神经内分泌系统HPA轴（下丘脑-垂体-肾上腺轴），使肾上腺分泌类固醇激素（糖皮质激素），而实验性研究表明，高浓度的糖皮质激素能降低NSC的增殖，许多NSC有表面蛋白（受体）与糖皮质激素结合，证明应激介导的HPA轴的激活和随后增加的糖皮质激素一定会间接地影响NSC的增殖^[4]。⑤酒精可以改变神经递质受体和信号，其中有两种神经递质，谷氨酸（兴奋性神经递质）和5-羟色胺（生物活性胺类物质），能影响成年NSC的增殖。糖皮质激素通过谷氨酸受体的特定亚型NMDA受体来抑制NSC增殖^[4]。⑥一种叫生长因子的蛋白质与调节处于增殖、迁移、分化和存活期的神经元及神经发生有关。酒精会通过影响生长因子的分泌，靶细胞和受体功能来干扰成年神经发生^[4]。

长期酒精滥用还会导致许多器官组织的坏死，包括肝、脾、心血管和免疫系统。这些损害的部分原因是由于干细胞增殖和死亡的失衡^[8]。

随着人们对神经干细胞了解的加深，以及许多关于酒精毒性的文章被发表，理解慢性酒精暴露及戒断后引起的神经干细胞增殖、分化的改变，对以后治疗和治愈酒精中毒所引起的神经退行性疾病非常有帮助，具有非常广阔的应用前景。

本实验通过免疫组化来观察慢性酒精暴露及戒断后对成年大鼠神经干细胞的变化，评估酒精成瘾